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實驗六 色素的提取和分離
1、原理:葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑丙酮或無水乙醇——提取色素 各色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上擴散速度不同——分離色素 2、步驟:
(1)提取色素 研磨 (2)制備濾紙條
(3)畫濾液細線:均勻,直,細,重復若干次 (干了之后) (4)分離色素:不能讓濾液細線觸及層析液
(5)觀察和記錄: 結(jié)果濾紙條上從上到下依次為:橙黃色(胡蘿卜素)、黃色(葉黃素)、藍綠色(葉綠素a)、黃綠色(葉綠素b). 考點提示:
(1)對葉片的要求?為何要去掉葉柄和粗的時脈?
綠色、較好是深綠色。因為葉柄和葉脈中所含色素很少。
(2)二氧化硅的作用?不加二氧化硅對實驗有何影響?
為了使研磨充分。不加二氧化硅,會使濾液和色素帶的顏色變淺。
(3)丙酮的作用?它可用什么來替代?用水能替代嗎?
溶解色素。它可用酒精等有機溶劑來代替,但不能用水來代替,因為色素不溶于水。
(4)碳酸鈣的作用?不加碳酸鈣對實驗有何影響?
保護色素,防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞。不加碳酸鈣,濾液會變成黃綠色或褐色。
(5)研磨為何要迅速?要充分?過濾時為何用布不用濾紙? 研磨迅速,是為了防止丙酮大量揮發(fā);只有充分研磨,才能使大量色素溶解到丙酮中來。色素不能通過濾紙,但能通過尼龍布。
(6)濾紙條為何要剪去兩角? 防止兩側(cè)層析液擴散過快。
(7)為何不能用鋼筆或圓珠筆畫線? 因為鋼筆水或圓珠筆油中含有其它色素,會影響色素的分離結(jié)果。
(8) 濾液細線為何要直?為何要重畫幾次?
防止色素帶的重疊;增加色素量,使色素帶的顏色更深一些。
(9) 濾液細線為何不能觸到層析液?
防止色素溶解到層析液中。
(10)濾紙條上色素為何會分離?
由于不同的色素在層析液中的溶解度不同,因而它們隨層析液在濾紙條上的擴散速度就不同。
(11)色素帶較寬的是什么色素?它在層析液中的溶解度比什么色素大一些? 較寬的色素帶是葉綠素a,它的溶解度比葉綠素b大一些。
(12)濾紙條上相互間距較大的是哪兩種色素? 胡蘿卜素和葉黃素。
(13)色素帶較窄的是第幾條色素帶?為何?
先進條色素帶,因為胡蘿卜素在葉綠體的四種色素中含量較少。